Ко Дню Российской науки: в БФУ им. И. Канта представляют новый метод диагностики жировой болезни печени (фоторепортаж)
Исследователи-биологи БФУ им. И. Канта совершенствуют методы диагностики неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП). Согласно статистике, заболевание, при котором жир накапливается в клетках печени, наблюдается у каждого третьего человека. Основные факторы риска — несбалансированное питание, избыточный вес и диабет. Отсутствие лечения может постепенно привести сначала к воспалению и стеатогепатиту, затем к фиброзу, циррозу и, как следствие, раку печени. Как правило, заболевание протекает бессимптомно. Первые признаки жировой болезни печени человек испытывает только при запущенной стадии, когда переход на сбалансированное питание уже не помогает и необходимо начать серьезное медикаментозное лечение. На сегодняшний день, биопсия ткани печени — единственный однозначный способ диагностики данного заболевания. Однако проведение биопсии связано с рядом побочных эффектов (кровотечение, анестезия, послеоперационная реабилитация и др).Усугубляет положение и длительный процесс постановки диагноза. От биохимического анализа крови до узи, МРТ и биопсии могут пройти недели.
Значительно сократить время и усовершенствовать методы диагностики предлагают сотрудники Центра иммунологии и клеточных биотехнологий.
«Перед нами стоит задача разработки высокоточного способа диагностики, основанного на анализе крови пациентов. Метод включает разработку специальной количественной шкалы измерений для ранней диагностики патологии. Мы разрабатываем и усовершенствуем три относительно доступных лабораторных анализа на основе молекулярно-генетических маркеров в крови пациентов: биохимический анализ крови, иммуноферментный анализ и ПЦР (полимеразная цепная реакция) — ключевой экспериментальный метод для детекции молекул микроРНК. Именно последний метод поможет с высокой специфичностью диагностировать и выявить патологию в печени», — рассказала научный сотрудник Центра иммунологии и клеточных биотехнологий Дарья Скуратовская.
Исследования проводятся на биологических образцах от больных пациентов и здоровых добровольцев. Помимо полной клинической информации и анамнеза, пациенты сдают биоматериал в ходе плановых операций. Для долгосрочного хранения биоматериалы (кровь, биоптаты печени и жира) от пациентов хранятся в жидком азоте в специальных контейнерах, при температуре около -196°C градусов.
Пробирка с образцом биоматериала в жидком азоте.
Для самого метода диагностики необходимо исследовать кровь. Пробирки с кровью помещают в центрифугу для разделения на сыворотку и клетки крови. Именно в плазме содержатся анализируемые белки, ферменты и микроРНК.
Первый метод диагностики — биохимический анализ крови. Полученную плазму в пробирках загружают в биохимический анализатор для общей оценки работы внутренних органов, в том числе печени.
Ученый производит иммуноферментный анализ провоспалительных факторов в крови. Так ученые получают детальную картину о содержании белков и пептидов в плазме крови. Количественные показатели выводятся на экран монитора.
Ключевой экспериментальный метод ПЦР для определения микроРНК в плазме крови пациентов.При жировой инфильтрации печени (ожирении или несбалансированном питании) развивается воспаление в органе. Специфические для печеночной ткани микроРНК, вследствие воспаления, попадают в кровяное русло. Уровень экспрессии микроРНК позволит поставить диагноз.
Иммунные клетки крови характеризуются на проточном цитометре, позволяющем исследовать клетки крови по таким показателям, как размер, гранулярность, оценить соотношение клеток (лейкоцитов, моноцитов и т.д.) в крови.
рис. 1 — здоровая печень
рис. 2 — неалкогольная жировая болезнь печени, крупные белые пятна — липидные капли (“жир”) в клетках печени.
На сегодняшний день, существуют разработки по отдельным маркерам заболевания. Каждый способ диагностики НАЖБП имеет свои преимущества и недостатки. Исследование наших биологов позволит объединить подходы и усовершенствовать диагностику заболевания.
